植物GUS染色

植物GUS染色

服务介绍

GUS基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase，GUS），该酶是一种水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解，它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为X-Gluc）水解，产生无色的吲哚氧基中间物，再经氧化二聚化作用形成不溶的深蓝色染料，使具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色。绝大多数植物细胞内不存在内源的GUS基因，GUS基因常作为转基因植物的报告基因，尤其广泛应用于研究外源基因瞬时表达转化实验。客户提供带GUS标签的转基因植株或者特定部位的植物组织样本，进行样本的整体染色后，即可清晰地观察到GUS基因在植物各个部位的定位分布及含量的差异。

实验流程：

新鲜带土或者带培养基的整株植物活体运输或植物组织-20℃保存干冰冷冻运输—37℃恒温箱避光染色—75%酒精脱色—观察采图。

结果判读：

GUS阳性蓝色，背景透明无色或浅黄色。

送样运输要求：

1、新鲜带土或者带培养基的整株植物活体运输；植物组织-20℃保存干冰冷冻运输，7d内送检。

2、整株植物染色时，样本长度不超过3cm。如超过3cm需将不同部位取下单独进行染色。

3、染完色采好图的组织样本，可取不同部位组织进一步做石蜡包埋和石蜡切片（建议8μm），脱蜡后中性树胶封片，显微镜观察采图或组织切片全景数字扫描（，进一步在显微结构下观察阳性信号及分布。