碱性磷酸酶（ALP）染色实验代测服务

信帆生物提供：碱性磷酸酶（ALP）染色实验代测服务

服务介绍：ALP染色（碱性磷酸酶染色）是一种用于检测细胞或组织中碱性磷酸酶（ALP）活性的实验方法。ALP是一种广泛存在于多种组织（如骨骼、肝脏、肾脏和胎盘）中的酶，其活性常被用作干细胞多能性、成骨细胞分化以及某些疾病（如肝病和骨病）的标志物。
检测原理：
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸不萘酚，后者不偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色，碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。
实验步骤：
1.、新鲜组织冰冻切片 6-8um 或者石蜡切片经脱蜡至水洗；
2、放入孵育液中置于 37℃温箱内孵育。冰冻切片 10-30min，石蜡切片 1-2h（阴性对照片用阴性对照孵育液）；
3、蒸馏水稍洗；
4、配制ALP孵育液：按照1:1的比例混合B1:AS-BI染色液和B2:FBB染色液
5、切片如ALP固定液固定3min，水洗；
6、滴加配制好的ALP孵育液，放入湿盒中，避光孵育15~20min，水洗；
7、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min，水洗；
8、冰冻切片用甘油明胶固定；石蜡切片常规脱水、透明及封固。
注意事项：
1、样本处理：确保样本新鲜，并及时进行固定处理，避免影响酶的活性。
2、染色液配制：ALP染色液应现配现用，避免长时间放置导致失效或降低阳性强度。
3、实验条件控制：严格控制实验条件，如温度、时间和pH值等，以确保染色效果的准确性和可靠性。
4、阳性对照：每次染色时，应设置阳性对照，以便对实验结果进行准确判断。

仅供科研实验用，不做其他用途！